第016章 完美的PCR实验

    第016章 完美的PCR实验 (第2/3页)



    中文名是“聚合酶链式反应”,又称“聚酶链式反应”,是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。

    能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段,于几小时内扩增至十万乃至百万倍。

    其原理基本与人体细胞内DNA复制像似,但反应体系相对简单。

    当然了,这不意味着PCR简单。

    相反,PCR是非常难的.

    首先通过高温“变性”,把一段双链结构的DNA解链,变成两条单链结构DNA。

    之后“退火”,在低温下让“引物”和作为模板的DNA互补结合,形成局部双链。

    最后中火“延伸”,通过DNA聚合酶催化以引物为起始点的DNA链产生延伸反应,变成两条双链结构的DNA。

    接下来不断重复这个过程。

    1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

    通过PCR技术,可以从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。

    比如亲子鉴定;

    比如疫苗研究;

    比如病毒疾病防治;

    又或者遗传病研究等等,都需要大量用到PCR。

    当然,周文今天做的水稻蚜虫生化试剂实验,其实是没有必要做PCR的。

    蚜虫是一种很低级的虫子,一般直接用药物作用在其身上,然后看它的遗传特性就行了。

    之所以还要做PCR,更多的目的也是为了学习PCR。

    PCR反应体系包含了水、缓冲液、DNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)、引物P1/P2/DNA模板以及TAQ酶。

    等一切都准备好之后,周文调节好提取枪的量程,然后提取30μl的水到三组PCR管里。

    吸液的时候严格按照操作规程,垂直吸液、慢吸慢放。

    换过枪头后,提取了5毫升的缓冲液到PCR管中。

    再分别向管中加入DNTP/P1/P2/DNA模板……

    得益于这段时间的学习,除了一开始有些紧张外,周文做起来有条不紊。

    等所需原料添加完毕后,接下来就是离心了。

    按照要求设定好转速后,等了三分钟,离心完成。

    周文从离心机里取出装着混合液的PCR管,立刻放到了PCR仪上,进行扩增。

    设定94℃预变性4min。

    然后设定20次循环扩增阶段。

    高温、低温、中温、高温……

    1变2,2变4,4变8,8变16,16变32……

    周文焦急的等待着,心情就像产房外的丈夫一样,心里默默祈祷着“母子平安”,同时也在想,不知道等会生出来的是男是女?身体健康与否?

    就在这时,周文突然想到系统积分可以加快实验进度,与

    (本章未完,请点击下一页继续阅读)